خالص سازی اینترلوکین-2 تولید شده در باکتری اشرشیا کلی نوترکیب

اینترلوکین-2 انسانی با 134 اسید آمینه و وزن ملکولی معادل 15517 دالتون، یک پروتئین تنظیم کننده در سامانه ایمنی است که باعث ایجاد سطح گسترده ای از پاسخ های ایمنی می شود. علاوه بر این، نقش مهمی در تکثیر و تمایز یافتن لمفوسیت های b و t دارد. اینترلوکین-2 دارای کاربردهای دارویی متنوعی است از جمله در درمان انواع سرطان ها مانند سرطان خون، بیماری های نقص ایمنی و همچنین در تحقیقات آزمایشگاهی به کار می رود. هدف از این پژوهش، خالص سازی پروتئین نو ترکیب اینترلوکین-2 انسانی تولید شده در آزمایشگاه از سویه نوترکیب e.coli است. در انجام این تحقیق از روش کروماتوگرافی تمایلی با استفاده از ni-nta آگارز برای خالص سازی استفاده شد. دو روش شستشوی متفاوت در مورد خالص سازی مورد استفاده قرار گرفت که عبارتند از: تغییر ph و استفاده از ایمیدازول. نتایج به دست آمده نشان داد که خالص سازی بهتری در صورت استفاده از ایمیدازول نسبت به تغییر ph حاصل شد. همچنین از آنجایی که پروتئین مورد نظر به صورت توده های پروتئینی غیرفعال تولید شد، پس از مراحل خالص سازی، مجموعه فرایند هایی برای بازیابی شکل فضایی آن انجام گرفت. بازیابی شکل فضایی اینترلوکین-2 در ستون کروماتوگرافی ni-nta آگارز با کاهش غلظت اوره از 0-8 مولار انجام شد. سپس، اینترلوکین-2 به دست آمده با آزمایش تکثیر لمفوسیت های t سنجیده شد و نشان داده شد که اینترلوکین-2 بازیابی شده فعالیت مناسبی را داراست.